Garis Wallace (
bahasa Inggeris: Wallace Line) adalah sempadan yang memisahkan ekozon
Asia dan
Wallacea (yang merupakan zon peralihan antara Asia dan
Australia). Di barat garis dijumpai organisma berkaitan dengan spesies Asia; di timur garis hadir spesies campuran asal Asia dan Australia. Garis ini dinamakan sempena
Alfred Russel Wallace, yang mendapati dengan jelas garis pemisah ini selama perjalanan melalui
Hindia Timur pada abad ke-19. Garis ini melintas melalui
Indonesia, antara
Borneo dan
Sulawesi, dan melalui
Selat Lombok antara
Bali (di barat) dan
Lombok (di timur).
Antonio Pigafetta juga mencatat perbezaan biologi yang berkontras antara
Filipina dan
Kepulauan Maluku (yang terletak di sisi berlawanan daripada garis) pada tahun 1521 selama mengikuti kelanjutan dari pelayaran
Ferdinand Magellan (iaitu selepas Magellan sendiri tewas di
Mactan, Filipina).Jarak antara Bali dan Lombok adalah kecil, hanya sekitar 35 kilometer. Pengedaran spesies
burung banyak yang mengikuti garis tersebut, kerana banyak burung menolak untuk menyeberangi bahkan bentangan terkecil air laut lepas. Beberapa
kelawar mempunyai pengedaran yang melintasi Garis Wallace, tetapi mamalia lain umumnya terbatas pada salah satu sisi sahaja. Sebuah contoh pembezaan adalah pada
kera. Ada kumpulan-kumpulan lain dari tanaman dan haiwan yang menunjukkan pola-pola berbeza, tetapi pola secara umum amatlah jelas dan cukup konsisten.