Santiago de Guayaquil,atau cuma Guayaquil (disebut [waʝaˈkil]), merupakan bandar paling besar dan paling ramai penduduk di Ecuador. Bandar ini merupakan pintu masuk atau pelabuhan utama bagi negara ini. Kedudukan bandar ini terletak di barat Sungai Guayas, yang mengalir hingga ke Teluk Guayaquil di Lautan Pasifik. Guayaquil dibangunkan pada 25 Julai, 1538 dengan diberi nama Muy Noble y Muy Leal Ciudad de Santiago de Guayaquil oleh penjajah Sepanyol, Francisco de Orellana. Dipercayai, sebelum ia dibangunkan, bandar ini merupakan satu kawasan perkampungan penduduk asli.