Pada 14 April, Lincoln pergi ke Teater Ford bersama isterinya untuk menonton sebuah babak cerita di Washington, D.C.

Dalam babak ketiga, babak yang melucukan sekali, Lincoln ketawa apabila satu babak di mana beliau telah ditembak. [5] John Wilkes Booth, seorang pelakon yang terkenal dan seorang pengintai Negeri-negeri Gabungan Amerika dari Maryland, memasuki tempat presiden dan melepaskan pistol di jarak dekat ke belakang kepala Lincoln dan menyebabkan Lincoln tercedera. [6]

Lincoln segera tidak sedarkan diri, tetapi dia tidak sedarkan diri dengan gelak ketawa dan senyuman di wajahnya. Katherine M. Evans, seorang pelakon muda dalam permainan, yang merupakan pelakon di pentas berkata "Saya melihat Presiden Lincoln dalam keadaan tidak sedarkan diri, kepalanya jatuh di atas dadanya, matanya ditutup, tetapi dengan senyuman masih di wajahnya ". Lincoln telah dibawa di seberang jalan untuk ke Rumah Petersen. Beliau telah diletakkan di atas sebuah katil. Beliau kekal dalam keadaan koma selama sembilan jam. Seorang doktor bergegas ke petak itu lalu memberi bantuan pernafasan mulut ke mulut kepada Lincoln. Kemudian, presiden itu dibawa ke sebuah rumah di seberang jalan dan dibaringkan di atas katil. Mary, yang hampir gila kerana terkejut dan kesedihan, juga turut bersama. Begitu juga Robert, anak lelaki mereka yang sulung yang menjadi kakitangan Jeneral Grant. Sebaik sahaja berita itu tersebar luas ke seluruh Washington, D.C., para doktor, negarawan dan rakan taulan datang melawat beliau.

Dengan segera, kumpulan pencari dihantar untuk menjejaki Booth. Naib Presiden, Andrew Johnson, telah dipanggil ke tempat kejadian. Di luar rumah presiden, sekumpulan orang ramai kegelisahan sedang menunggu berita. Pada jam 7:22 pagi hari Sabtu, 15 April 1865, beliau meninggal dunia. Beliau merupakan presiden Amerika Syarikat yang pertama yang mati dibunuh.

Booth melarikan diri, tetapi mati akibat tembakan semasa dia ditangkap pada 26 April.