Penerbitan keenam Union Films, Soeara Berbisa telah dihasilkan oleh Ang Hock Liem dan diarahkan oleh R Hu, seorang pengarah berketurunan Cina yang bekerja dengan syarikat itu sejak 1940; juruteknik bunyi Boen Kin Nam berkhidmat sebagai penolong pengarah. Lakon layar ditulis oleh Djojopranoto, yang menggantikan bekas penulis skrip Union, Saeroen selepas meninggalkan syarikat Union untuk ke syarikat pesaing Star Film setelah Wanita dan Satria (1941).[1] Filem ini memulakan penerbitan pada September 1941,[2] dan menjelang Oktober ia hampir lengkap.[3]

Soeara Berbisa dibintangi oleh Raden Soekarno dan Ratna Djoewita, serta menonjolkan bakat Pemangku Oedjang dan Soehaena. Soekarno dan Soehana ialah pendatang baru,[4] manakala Oedjang dan Djoewita sebelum ini pernah bekerja bersama Union sejak penerbitan pertama Union, Kedok Ketawa pada tahun 1940, dan kemudiannya berlakon peranan dalam Wanita dan Satria.[5] Filem hitam putih itu memuatkan beberapa lagu keroncong, dan sebahagiannya difilemkan di kawasan Preanger, yang terletak di Jawa Barat.[6]